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[응용자료] 모유 속의 PFAS 분석(과불화화합물)
국내 산모의 모유에서 자연적으로 분해되지 않고 환경에 장기간 축적되는 물질인 '과불화화합물(per- and polyfluoroalkyl substance, PFAS)'이 100% 검출됐다는 연구 결과가 나왔습니다. PFAS는 우리 몸에 들어가게 되면 암이나, 간 손상을 일으킬 수도 있어 국내에서는 제품에 따라 과불화화학물 사용을 일부 규제하고 있습니다.
모유 내 PFAS 분석 Analysis of PFAS in Breast Milk : Capriva EMR-Lipid
과불화화합물(per- and polyfluoroalkyl substance, PFAS)이란 불소와 탄소가 결합한 인공 복합 물질로 방수, 방오염 등의 유익한 특성 덕분에 다양한 소비재 제조에 쓰입니다. 반면 생식 및 면역 독성과 내분비 교란, 대사 증후군 등 문제로 인체 유해성이 끊임없이 지적되어 왔습니다. 특히 화학적으로 강한 공유 결합 탓에 쉽게 분해되지 않는다는 게 강점이자 문제점입니다. 산모의 모유에 이 같은 유해물질이 녹아있다면 엄마의 건강뿐 아니라 그 모유를 먹게 된 영유아에겐 더 큰 해를 미칠 수 있습니다.
본 실험에서는 일반적으로 PFAS분석에는 약한 음이온 교환( WAX ) 흡착제를 사용하는 고체상 추출 SPE 법이 사용되지만 Captiva EMR-Lipid를 사용한 여과를 통해 단백질과 인지질을 동시에 제거하는 대체 시료 준비는 유사한 결과를 얻으면서 복잡한 비용을 크게 줄입니다.
<시료전처리준비>
2g 샘플 + 8ml ACN 30동안 초음파 후 원심분리 |
|
| SPE with WAX | Captiva EMR-Lipid |
↓ |
↓ |
| 상등액을 2ml 까지 건조시킨 후 D.W 넣어 6ml로 만듬 | Sample Loading : Captiva EMR-Lipd에 6ml 의 상등액 로딩 |
| ↓ | ↓ |
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BondElut PFAS WAX 카트리지 Conditioning: ①6ml 0.5% NH4OH + MeOH ②6ml D.W
|
Elute : 1.5ml (80:20 = ACN:D.W) |
| ↓ | ↓ |
|
Sample Loading Wash : ① 6ml D.W ②6ml MeOH : Water (1:9)
|
|
| ↓ | |
| Elute : 3ml 0.5% NH4OH + MeOH x 2 | |
| ↓ | |
| 최종시료 : 추천 200ul (96:4 = MeOH:D.W) | |
<실험방법>
1. LC 조건
| Analytical Column | Agilent Zorbax EclipsePlus C18 RRHD, 2.1x100mm, 1.8 µm | |
| Injection Volume | 5 µL | |
| Mobile Phase A | 95% Water + 2 mM ammonium acetate + 5% acetonitrile | |
| Mobile Phase B | Acetonitril | |
| Needle Wash |
50:20:20:10 Isopropanol:Methanol:Acetonitrile :Water |
|
| Autosampler Temp | 4℃ | |
| Column Temp | 40℃ | |
| Flow Rate | 0.4 mL/min | |
| Gradient |
Time 0.00 0.20 10.00 |
%B 2 2 95 |
| Stop Tim | 12.20 min | |
| Post Time | 2.00 min | |
2. LC-MS 조건
| Gas Temp | 230℃ |
| Gas Flow | 8 L/min |
| Nebulizer Pressure | 20 psi |
| Sheath Gas Temp | 355℃ |
| Sheath Gas Flow | 10 L/min |
| Capillary Voltage | 2500 V |
| Nozzle Voltage | 0 V |
3. 결과
Captiva EMR-Lipid를 이용한 시료 전처리는 기존 SPE WAX 방법과 비교해볼때 backgrand가 크게 감소 하였습니다.
또한 PFAS에 대해 더 우수하거나 비슷한 회수율을 보여주었고, 더 적은 단계를 거치기 때문에 더 오염이 적고 효율적입니다.

그림1. 왼쪽 : Wax(파란색) vs Captivia EMR-Lipid(녹색) 크로마토그램 overlaid 오른쪽 : Overlaid TICs of WAX (green) vs. EMR (brown)
응용자료: 첨부파일 확인
4. 관련 제품 안내
1) 시료 전처리 제품
| 품번 | 품명 | 단위 | 제품안내 |
|---|---|---|---|
| 5190-1003 | Captiva EMR-Lipid, 3 mL cartridges, with 300 mg sorbent mass | 100/pk | |
| 5190-1004 | Captiva EMR-Lipid, 6 mL cartridges, with 600 mg sorbent mass | 50/pk | |
| 5610-2151 | Bond Elut PFAS WAX, 200 mg, 6 mL | 30/pk | |
| 5610-2152 | Bond Elut PFAS WAX, 500 mg, 6 mL | 30/pk |
2) 분석 컬럼 제품
| 품번 | 품명 | 단위 | 제품안내 |
|---|---|---|---|
| 959758-902 | RRHD Eclipse Plus C18,2.1x100mm,1.8u | 1EA |
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