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[응용자료] 모유 속의 PFAS 분석(과불화화합물)

  • 문의유형 : 정보
  • 작성자 : 관**
  • 작성일 : 2024.05.16
  • 조회수 : 739


국내 산모의 모유에서 자연적으로 분해되지 않고 환경에 장기간 축적되는 물질인 '과불화화합물(per- and polyfluoroalkyl substance, PFAS)'이 100% 검출됐다는 연구 결과가 나왔습니다. PFAS는 우리 몸에 들어가게 되면 암이나, 간 손상을 일으킬 수도 있어 국내에서는 제품에 따라 과불화화학물 사용을 일부 규제하고 있습니다. 






모유 내 PFAS 분석 Analysis of PFAS in Breast Milk : Capriva EMR-Lipid


과불화화합물(per- and polyfluoroalkyl substance, PFAS)이란 불소와 탄소가 결합한 인공 복합 물질로 방수, 방오염 등의 유익한 특성 덕분에 다양한 소비재 제조에 쓰입니다. 반면 생식 및 면역 독성과 내분비 교란, 대사 증후군 등 문제로 인체 유해성이 끊임없이 지적되어 왔습니다. 특히 화학적으로 강한 공유 결합 탓에 쉽게 분해되지 않는다는 게 강점이자 문제점입니다. 산모의 모유에 이 같은 유해물질이 녹아있다면 엄마의 건강뿐 아니라 그 모유를 먹게 된 영유아에겐 더 큰 해를 미칠 수 있습니다. 


본 실험에서는 일반적으로 PFAS분석에는  약한 음이온 교환( WAX )  흡착제를 사용하는 고체상 추출 SPE 법이 사용되지만 Captiva EMR-Lipid를 사용한 여과를 통해 단백질과 인지질을 동시에 제거하는 대체 시료 준비는 유사한 결과를 얻으면서 복잡한 비용을 크게 줄입니다.


<시료전처리준비>


2g  샘플 + 8ml ACN

30동안 초음파 후 원심분리

SPE with WAX Captiva EMR-Lipid

상등액을  2ml 까지 건조시킨 후 D.W 넣어 6ml로 만듬

Sample Loading :
Captiva EMR-Lipd에 6ml 의 상등액 로딩

BondElut PFAS WAX 카트리지
       Conditioning: ①6ml 0.5% NH4OH + MeOH
②6ml D.W

Elute : 1.5ml (80:20 = ACN:D.W)

Sample Loading 

Wash : ① 6ml D.W
                               ②6ml MeOH : Water (1:9)

Elute : 3ml 0.5% NH4OH + MeOH x 2
최종시료 : 추천 200ul (96:4 = MeOH:D.W)





<실험방법>


1. LC 조건

Analytical Column Agilent Zorbax EclipsePlus C18 RRHD, 2.1x100mm, 1.8 µm
Injection Volume 5 µL
Mobile Phase A 95% Water + 2 mM ammonium acetate + 5% acetonitrile
Mobile Phase B Acetonitril
Needle Wash

50:20:20:10

Isopropanol:Methanol:Acetonitrile

:Water

Autosampler Temp 4℃
Column Temp 40℃
Flow Rate 0.4 mL/min
Gradient

Time

0.00

0.20

10.00

%B

2

2

95

Stop Tim 12.20 min
Post Time 2.00 min



2. LC-MS 조건

Gas Temp 230℃
Gas Flow 8 L/min
Nebulizer Pressure 20 psi
Sheath Gas Temp 355℃
Sheath Gas Flow 10 L/min
Capillary Voltage 2500 V
Nozzle Voltage 0 V



3. 결과

Captiva EMR-Lipid를 이용한 시료 전처리는 기존 SPE  WAX 방법과 비교해볼때 backgrand가 크게 감소 하였습니다. 

또한 PFAS에 대해 더 우수하거나 비슷한 회수율을 보여주었고, 더 적은 단계를 거치기 때문에 더 오염이 적고 효율적입니다. 




그림1. 왼쪽 : Wax(파란색) vs Captivia EMR-Lipid(녹색) 크로마토그램 overlaid      오른쪽 : Overlaid TICs of WAX (green) vs. EMR (brown)


응용자료: 첨부파일 확인




4. 관련 제품 안내


1) 시료 전처리 제품


품번 품명 단위 제품안내
5190-1003 Captiva EMR-Lipid, 3 mL cartridges, with 300 mg sorbent mass 100/pk
5190-1004 Captiva EMR-Lipid, 6 mL cartridges, with 600 mg sorbent mass 50/pk
5610-2151 Bond Elut PFAS WAX, 200 mg, 6 mL 30/pk
5610-2152 Bond Elut PFAS WAX, 500 mg, 6 mL 30/pk


2) 분석 컬럼 제품


품번 품명 단위 제품안내
959758-902 RRHD Eclipse Plus C18,2.1x100mm,1.8u 1EA